上傳時(shí)間：2023/6/15 0:00:00 來源：易買儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊：779
洗滌法
即非酶重量法包括有粗纖維法( CF法)、酸性洗滌劑纖維法( ADF法)、中性洗滌劑纖維法( NDF法)這三種檢測(cè)方法各有其側(cè)重點(diǎn)粗纖維法側(cè)重于對(duì)木質(zhì)素及纖維素的檢測(cè)；酸性洗滌劑纖維法側(cè)重于對(duì)木質(zhì)素、纖維素和酸不溶性半纖維素的檢測(cè)；中性洗滌劑纖維法側(cè)重于對(duì)木質(zhì)素、纖維素及中性洗滌劑不溶性半纖維素的檢測(cè)。
酶-重量法
這是一種簡(jiǎn)便可行的檢測(cè)方法采用酶解除去淀粉及部分蛋白質(zhì)殘留物對(duì)其進(jìn)行稱重進(jìn)行蛋白質(zhì)和灰分的校正測(cè)定無法消化的物質(zhì)。這種檢測(cè)方法精度較高然而操作相對(duì)繁瑣。在檢測(cè)的過程中,可以改變緩沖液濃度、引入不同酶體系等方式優(yōu)化和提升檢測(cè)效率，節(jié)約檢測(cè)成本。這種方法適用于所有植物性食品及制品中膳食纖維的檢測(cè)然而無法檢測(cè)低聚果糖、抗性麥芽糊糊抗性淀粉等組分。
以肉類制品的檢測(cè)為例,因其內(nèi)含較高的脂肪,應(yīng)當(dāng)在用石油醚脫除肉制品中的脂肪前提下進(jìn)行樣品配比測(cè)定展開對(duì)每克25 mL的肉制品的三次配比測(cè)定再將其干燥、粉碎處理計(jì)算得出干燥后的肉制品的脂肪回收率。在采用酶-重量法進(jìn)行膳食纖維檢測(cè)的過程中主要包括以下測(cè)定環(huán)節(jié):
( 1)樣品溶解。
在這一環(huán)節(jié)中先稱量大約1g的酶解樣品,盛放于250 mL的錐形瓶之中并添加40 mL的緩沖溶液振蕩使樣品溶解。
(2)酶解環(huán)節(jié)。
在盛放樣品的錐形瓶中添加50μL的a-淀粉酶溶液再將其密封加熱至95 ~ 100℃產(chǎn)生酶解反應(yīng),持續(xù)半個(gè)小時(shí)并刮脫錐形瓶存留的網(wǎng)狀物、膠狀物使酶徹底分解。繼而再添加100μL的蛋白酶溶液密封錐形瓶并加熱至60℃恒溫狀態(tài)使之酶解反應(yīng)持續(xù)半個(gè)小時(shí)；調(diào)節(jié)pH值并添加100uL的糖苷酶溶液同樣加熱至60℃恒溫狀態(tài)使之酶解反應(yīng)持續(xù)半個(gè)小時(shí)使淀粉葡萄糖得到充分酶解。
(3)將預(yù)熱到60℃的95%乙醇添加到酶解樣品中在20 ~ 25℃的環(huán)境下沉淀。再用78%的15mL乙醇進(jìn)行濕潤(rùn)恒重處理將其置于硅藻士的砂芯坩堝之內(nèi)抽濾樣品液用乙醇溶液和丙酮洗滌抽干稱重計(jì)算坩堝中殘?jiān)馁|(zhì)量并計(jì)算灰分及蛋白質(zhì)樣品的質(zhì)量。
高效液相色譜檢測(cè)法
可以采用高效液相色譜法檢測(cè)食品中可溶性膳食纖維一聚葡萄糖的含量和分子量。因聚葡萄糖是普遍采用的低熱量的食品添加劑不能被人體小腸所吸收但能夠被大腸發(fā)酵是一種新型可溶性膳食纖維,因其不能被80%的乙醇沉淀,因而無法采用酶一重量法進(jìn)行檢測(cè),而應(yīng)當(dāng)采用W凝膠色譜柱測(cè)定聚葡萄糖分子量和含量。選取高效液相色譜、示差檢測(cè)器、柱溫箱、超純水過濾系統(tǒng)為主要儀器測(cè)定所需的色譜條件主要為:液相色譜柱、水流動(dòng)相、流速為0.5ml/min、柱溫為40℃、進(jìn)樣量為20μL。精準(zhǔn)稱量樣品置于容量瓶中超聲溶解并混勻經(jīng)過0.45μm濾膜、進(jìn)樣再依循色譜條件進(jìn)行HPLC測(cè)定分析獲取樣品中聚葡萄糖的含量。
